2021-4-9 | 生物科學(xué)論文
在20世紀(jì)90年代,我國分子生物學(xué)家和育種學(xué)家合作,獲得了具有自主知識產(chǎn)權(quán)的轉(zhuǎn)基因抗蟲棉花植株和相關(guān)專利,育成的眾多品種已在全國各個棉區(qū)普遍種植。農(nóng)業(yè)部在上世紀(jì)90年代,分別對轉(zhuǎn)基因抗蟲棉、轉(zhuǎn)基因抗病番茄、甜椒等授予了安全證書,但后兩者由于無明顯商業(yè)價值,并未應(yīng)用于生產(chǎn)。按照我國農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全管理?xiàng)l例,經(jīng)過5個階段嚴(yán)格的安全評價后,農(nóng)業(yè)部于2009年11月向轉(zhuǎn)cry1Ab/cry1Ac基因抗蟲水稻華恢1號、轉(zhuǎn)cry1Ab/cry1Ac基因抗蟲水稻Bt汕優(yōu)63在湖北省的生產(chǎn)應(yīng)用,以及轉(zhuǎn)植酸酶基因玉米BVLA430101在山東省生產(chǎn)應(yīng)用發(fā)放了安全證書,但這些品種仍須通過品種審定方可進(jìn)入種子銷售市場。
作為植物生物技術(shù)發(fā)展較早的國家,美國自上世紀(jì)90年代以來,不斷有新產(chǎn)品(品種)的研發(fā),并經(jīng)由美國農(nóng)業(yè)部動植物檢疫部門、環(huán)保局、食品藥品管理局等生物技術(shù)產(chǎn)品監(jiān)管機(jī)構(gòu)根據(jù)產(chǎn)品對人類或動物食用、對環(huán)境安全影響的全面評價而確定能否進(jìn)入市場。表2列出了1990—2012年美國已批準(zhǔn)種植的轉(zhuǎn)基因作物及所改造的性狀。表中列出的10種植物中,馬鈴薯和番茄生物技術(shù)產(chǎn)品的研發(fā)主要在20世紀(jì)90年代,但由于應(yīng)用價值不高,并未得到廣泛應(yīng)用;苜蓿、水稻等為較近期開發(fā)的產(chǎn)品。改造的性狀已從早期單純集中于耐除草劑(大豆、油菜)、抗蟲(玉米、棉花)發(fā)展到通過基因改造與常規(guī)雜交等手段結(jié)合,同時改造多個性狀,包括改良營養(yǎng)性狀(如提高大豆、油菜種子油成分中不飽和脂肪酸含量,以改進(jìn)油營養(yǎng)成分),提高對非生物脅迫抗性(如抗旱玉米的培育)等。而復(fù)合2種或3種性狀的生物技術(shù)作物的種植面積有明顯的增長,已有不少商用品種是既耐除草劑又抗蟲的,近年來復(fù)合性狀的范圍更有所擴(kuò)大,如,應(yīng)用大豆遺傳圖譜定位和轉(zhuǎn)基因技術(shù)結(jié)合,美國孟山都生物技術(shù)公司(簡稱孟山都)2009年推出了既耐除草劑又可增產(chǎn)7%~11%的大豆新品種RReady2Yield。
植物生物技術(shù)的新進(jìn)展及前景
據(jù)聯(lián)合國糧農(nóng)組織估計(jì),為保證全球人口增長的需求,在2005—2050年期間,全球食品生產(chǎn)的增加要達(dá)到70%。在增加農(nóng)業(yè)產(chǎn)品的同時,還須面對減少資源耗用、滿足消費(fèi)者對健康食品需求等問題,這些都對植物育種提出了新的要求。作為當(dāng)代育種重要手段之一的生物技術(shù)育種,近年來也把育種目標(biāo)更多地轉(zhuǎn)向高產(chǎn)、抗逆(非生物脅迫)、高品質(zhì)等,即所謂第2代轉(zhuǎn)基因育種。能合成類胡蘿卜素的金稻米和抗旱玉米MON87460是其中2個成功的例子。
維生素A缺乏可引起夜盲、干眼病、角膜軟化,甚至與兒童腹瀉等有關(guān),估計(jì)全球有過億兒童處于維生素A缺乏狀態(tài)。2000年,瑞士和德國的科學(xué)家領(lǐng)導(dǎo)的團(tuán)隊(duì)在《Science》上發(fā)表了他們通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法,把來自植物黃水仙和細(xì)菌的β-胡蘿卜素合成途徑相關(guān)酶基因———八氫番茄紅素合成酶基因(PSY)、番茄紅素脫氫酶基因(CRT1)、番茄紅素環(huán)化酶基因(帶轉(zhuǎn)運(yùn)肽),用3個質(zhì)粒共轉(zhuǎn)化水稻未成熟胚,潮霉素篩選,獲得了種子胚乳為黃色、干種子中胡蘿卜素質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1?6μg/g的轉(zhuǎn)基因水稻株系,開創(chuàng)了這一通過轉(zhuǎn)基因賦予稻米新營養(yǎng)成分的新領(lǐng)域,因其黃色的胚乳而被命名為金稻米。然而,由于產(chǎn)生的胡蘿卜素含量太低,缺乏實(shí)用上的意義。隨后的數(shù)年,這2位科學(xué)家與先正達(dá)公司合作,從導(dǎo)入的基因、啟動子來源、篩選標(biāo)記以及載體的選擇等方面,作了一系列的改變[2],如用以糖為篩選基礎(chǔ)的標(biāo)記代替了抗生素抗性的篩選系統(tǒng),選用胚乳特異表達(dá)啟動子、不同水稻品種用于轉(zhuǎn)化等;而關(guān)鍵的突破來自PSY來源的改變,先正達(dá)公司的科學(xué)家經(jīng)大量的比較、分析,發(fā)現(xiàn)導(dǎo)入來自玉米的PSY,可明顯把轉(zhuǎn)基因水稻干種子胚乳中胡蘿卜素質(zhì)量分?jǐn)?shù)提高到最高可達(dá)36?7μg/g的水平,其中維生素A的前體β-胡蘿卜素占80%以上,獲得了GR1/GR2等株系。β-胡蘿卜素被人吸收后,可經(jīng)歷酶解過程而轉(zhuǎn)化為維生素A,按照美國國家科學(xué)院醫(yī)學(xué)研究所推薦的兒童每天所需維生素A的攝入量,如以金稻米中胡蘿卜素質(zhì)量分?jǐn)?shù)的保守估計(jì)為24μg/g計(jì)算,只需食用72g大米即可提供兒童每天維生素A需求的50%。成人的自愿食用試驗(yàn)結(jié)果表明,食用量為65~98g即可明顯提高血液中維生素A的含量,可見大米中的β-胡蘿卜素能有效地轉(zhuǎn)化為維生素A。
金稻米的開發(fā)是學(xué)術(shù)機(jī)構(gòu)(公共部門)和生物技術(shù)企業(yè)(私人部門)合作完成的,為保證其使用達(dá)到減少世界上貧困人口、特別是兒童中的維生素A缺乏癥的研發(fā)目標(biāo),享有發(fā)明權(quán)和專利權(quán)的科學(xué)家和公司已達(dá)成協(xié)議,無償授予發(fā)展中國家對相關(guān)品種的使用權(quán)。2005—2010年,通過一系列育種項(xiàng)目,這一性狀已轉(zhuǎn)育到世界各地多個地方品種中,近期已在國際水稻研究所和菲律賓水稻研究所完成田間試驗(yàn),后者擬在2013年向菲律賓政府監(jiān)管當(dāng)局申報(bào),爭取2014年開始交給農(nóng)民種植。
全球氣候的異常變化、水資源的短缺使耐旱成為了一個重要的育種目標(biāo)。孟山都的科學(xué)家發(fā)現(xiàn)把來自細(xì)菌的冷擊蛋白CSP轉(zhuǎn)入植物,能賦予受體對非生物脅迫的抵抗能力,如寒冷(擬南芥),冷、熱和缺水(水稻),干旱(玉米)等。初步研究顯示,CSP為一類RNA伴侶蛋白,存在于細(xì)菌和植物中,可能通過在轉(zhuǎn)錄和翻譯中起作用而調(diào)節(jié)生物對脅迫的反應(yīng)。鑒于美國中西部玉米種植區(qū)常有旱情,他們的進(jìn)一步研究集中于玉米的抗旱性,在對多個基因和轉(zhuǎn)化事件的表型和表達(dá)分析比較后,選定了產(chǎn)量、葉片生長、光合效率均表現(xiàn)良好的CspB?Zm事件1株系,并與生產(chǎn)品種配成3個雜交組合,進(jìn)行控制給水條件下的田間試驗(yàn),與非轉(zhuǎn)基因?qū)φ毡容^,主要表現(xiàn)在籽粒數(shù)和帶籽粒的穗數(shù)增加,平均可增產(chǎn)0?5t/hm2(10?5%);隨后在美國中西部干旱地區(qū)田間種植,增產(chǎn)達(dá)0?75t/hm2(15%)。該品系內(nèi)轉(zhuǎn)入的目標(biāo)基因CspB來自枯草芽孢桿菌,命名為MON87460,2010年12月美國食品藥品監(jiān)管局已承認(rèn)該產(chǎn)品的食用安全評價,2011年12月美國農(nóng)業(yè)部解除對其監(jiān)管,成為全球第1個可供生產(chǎn)應(yīng)用的抗旱轉(zhuǎn)基因作物品種。其與常規(guī)品種雜交獲得的雜交種Drought?GardHybrid已作為孟山都公司的重要新產(chǎn)品在美國推出,以圖提高干旱地區(qū)的玉米產(chǎn)量穩(wěn)定性,有利于農(nóng)民及環(huán)境。