雞消化道內(nèi)的菌群定植需要一個(gè)過(guò)程，3-7日齡是雛雞腸道內(nèi)菌群形成階段，7-16日齡雛雞消化道內(nèi)的正常菌群基本完成[1]，而在此之前，有益菌群未完全定植于腸道上皮細(xì)胞，容易受到外界病原菌的侵害，大部分的養(yǎng)殖者便采用飼料中添加抗生素來(lái)預(yù)防。但近年來(lái)，隨著抗生素的耐藥性和內(nèi)源性感染等問(wèn)題的日益嚴(yán)重，世界各國(guó)都在相繼立法，限制部分或完全禁止抗生素用作飼料添加劑[2]。微生態(tài)制劑作為替代飼用抗生素的添加劑，正憑借其安全、優(yōu)質(zhì)、無(wú)公害及有效的促生長(zhǎng)作用被越來(lái)越多的人所認(rèn)可。我國(guó)農(nóng)業(yè)部公告（第318號(hào)）批準(zhǔn)使用的微生物飼料添加劑有15種[3]，植物乳桿菌（LactobacillusPlantarum）便是其中一種，其能分解食物中的蛋白質(zhì)和糖類(lèi)、合成維生素，能顯著提高食物生物效價(jià)，促進(jìn)消化吸收。前人對(duì)于乳酸菌對(duì)動(dòng)物機(jī)體的影響研究已比較多，但是對(duì)于不同添加水平的植物乳桿菌對(duì)肉雞免疫機(jī)能影響的研究還較少。本試驗(yàn)旨在對(duì)肉雞飼喂不同添加水平的植物乳桿菌，研究其分別對(duì)肉雞血清總蛋白含量、IgG含量及NDV抗體效價(jià)的影響，以便為植物乳桿菌在動(dòng)物生產(chǎn)中的推廣和應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)材料

微生態(tài)制劑：植物乳桿菌菌粉，山東寶來(lái)利來(lái)生物工程股份有限公司生產(chǎn)。試驗(yàn)動(dòng)物：1日齡健康愛(ài)拔益加（AA）肉雞，購(gòu)自山東民和牧業(yè)股份有限公司。雞新城疫弱毒苗和傳染性法氏囊疫苗均購(gòu)自揚(yáng)州威克生物工程有限公司。試驗(yàn)日糧：參照AA肉雞營(yíng)養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)自行配制的玉米-豆粕型全價(jià)料，按第一（1-14日齡）和第二（15-42日齡）兩個(gè)階段配制，不添加任何抗生素、藥物及微生態(tài)添加劑。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1試驗(yàn)設(shè)計(jì)與分組

本試驗(yàn)選用健康體重狀況基本相同的1日齡AA肉雞420羽。隨機(jī)分成7組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20只。Ⅰ組為對(duì)照組，飼喂基礎(chǔ)日糧；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ組為微生態(tài)制劑組，在飼喂基礎(chǔ)飼糧的同時(shí)，分別定時(shí)在飲水中添加1.0‰、2.0‰、4.0‰、6.0‰、8.0‰、1.0%的植物乳桿菌，之前需禁水0.5h，確保乳酸菌在最短時(shí)間內(nèi)全部被雞只攝入，之后再補(bǔ)充清水。試驗(yàn)期42天。

1.2.2飼養(yǎng)管理

所有參試雞采用籠養(yǎng)方式。雞只自由采食、充足飲水。舍內(nèi)光照、溫度和濕度嚴(yán)格按照常規(guī)飼養(yǎng)管理要求進(jìn)行控制。每日換食換水前進(jìn)行食槽和飲水器的清洗工作。試驗(yàn)期間詳細(xì)觀察、檢測(cè)并記錄各組試驗(yàn)指標(biāo)及試驗(yàn)雞的健康狀況。免疫程序：分別于7和21日齡，按規(guī)定劑量和方法對(duì)雞進(jìn)行新城疫疫苗的滴鼻點(diǎn)眼免疫；14日齡時(shí)，進(jìn)行法氏囊滴鼻點(diǎn)眼免疫。

1.2.3樣品采集及檢測(cè)指標(biāo)

（1）血液中血清總蛋白含量的測(cè)定：分別于14、21、28、35、42日齡清晨（禁食12h，僅供飲水）以重復(fù)組為單位，從中隨機(jī)選取2只接近平均體重的健康雞只，頸靜脈采血，常規(guī)方法分離血清，利用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血清總蛋白含量。（2）IgG含量的測(cè)定：采集血清（方法同上），利用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血清中的IgG含量。（3）NDV抗體效價(jià)的測(cè)定：采集血清（方法同上），按照血凝抑制試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)血清中的NDV抗體效價(jià)。

1.2.4數(shù)據(jù)處理

采用SPPS17.0軟件One－WayANOVA對(duì)上述數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，用Dun-can’s方法進(jìn)行多重比較。試驗(yàn)數(shù)據(jù)用平均數(shù)M±標(biāo)準(zhǔn)差SD表示。

2結(jié)果與分析

2.1植物乳桿菌對(duì)肉雞血清總蛋白含量的影響

由表1可知，14-42日齡各添加組的血清總蛋白含量均高于對(duì)照組。其中，第14日齡時(shí)，Ⅱ組和Ⅲ組顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，21日齡時(shí)，Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，28日齡時(shí)，Ⅳ組顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。35日齡及之后，各添加組之間以及與對(duì)照組之間差異均不顯著。從整體情況來(lái)看，隨著日齡的不斷增加各組的血清總蛋白含量是上升的，以Ⅱ組的效果最好最穩(wěn)定，且在21日齡之前均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，其次為Ⅲ組和Ⅰ組。

2.2植物乳桿菌對(duì)肉雞血清中IgG含量的影響

由表2可知，除了14、28和35日齡時(shí)，Ⅰ組低于對(duì)照組以外，各添加組在任意時(shí)段的IgG含量均高于對(duì)照組，其中，14日齡時(shí)Ⅱ組和Ⅲ組顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。21日齡時(shí)，Ⅱ組顯著高于Ⅰ組，且Ⅰ組、Ⅱ組和Ⅲ組均顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。28日齡時(shí)，Ⅱ組和Ⅲ組顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。因此，整體來(lái)看，以Ⅱ組和Ⅲ組提高IgG含量效果最好，且在28日齡之前顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。

2.3植物乳桿菌對(duì)肉雞NDV效價(jià)的影響

從表3可以看出，14-42日齡各添加組的NDV效價(jià)均高于對(duì)照組。其中，21日齡時(shí)，Ⅱ組和Ⅲ組顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。42日齡時(shí)，Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。其他時(shí)間各添加組之間以及與對(duì)照組之間差異均不顯著。從表中我們還可以看出，隨著日齡的不斷增長(zhǎng)，對(duì)照組的NDV效價(jià)是先降低后升高降低的，這是因?yàn)?日齡和21日齡對(duì)雞進(jìn)行了新城疫滴鼻點(diǎn)眼免疫，7日齡免疫完之后，NDV效價(jià)應(yīng)該是逐漸上升，14日齡之后有下降的趨勢(shì)，到21日齡時(shí)，又加強(qiáng)了免疫，NDV效價(jià)逐漸上升，35日齡之后出現(xiàn)下降的趨勢(shì)。各植物乳桿菌的添加組，則是隨著日齡的增長(zhǎng)，一直處于上升的趨勢(shì)，35日齡之后趨于穩(wěn)定，并且各添加組在任意時(shí)刻的NDV效價(jià)均高于對(duì)照組，尤其以Ⅲ組和Ⅱ組的效果最好。

3討論

3.1植物乳桿菌對(duì)肉雞血清總蛋白含量和IgG的影響

乳酸菌能通過(guò)淋巴循環(huán)活化全身的免疫防御系統(tǒng)，激發(fā)機(jī)體的體液免疫和細(xì)胞免疫，誘導(dǎo)干擾素、白細(xì)胞介素等細(xì)胞因子的產(chǎn)生，刺激腸道產(chǎn)生黏膜抗體，增強(qiáng)機(jī)體抑制癌細(xì)胞增殖的能力，從而提高機(jī)體局部免疫功能力，抵御感染。Huang［4］等研究發(fā)現(xiàn)，添加無(wú)活性嗜酸性乳酸桿菌可顯著提高肉仔雞30日齡血清IgA和IgG水平。王晶［5］等也得出同樣的。本試驗(yàn)中血清總蛋白含量的測(cè)定結(jié)果表明，各添加組在任何時(shí)期的清總蛋白含量均高于對(duì)照組，在整個(gè)過(guò)程中以Ⅱ組的效果最好；IgG含量的測(cè)定結(jié)果表明，以Ⅱ組和Ⅲ組效果最好，尤其在28日齡之前均顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。