葛根素注射液質(zhì)量研究發(fā)表省級(jí)職稱論文

　　【摘要】 目的：葛根素注射液的變色、pH值快速下降、過敏反應(yīng)發(fā)生率高、三大質(zhì)量問題嚴(yán)重影響了該品種的生產(chǎn)和使用，必須加以研究解決。方法：分析了各種問題產(chǎn)生的原因，確定了解決辦法。結(jié)果：按新方法制備的成品，全部解決了上述質(zhì)量問題。結(jié)論：改進(jìn)后生產(chǎn)的成品質(zhì)量穩(wěn)定可靠，使用更加安全。

　　【關(guān)鍵詞】 葛根素注射液 藥液變色 pH值快速下降 過敏反應(yīng) 問題研究

　　葛根素是由中藥材葛根中提取的有效成份，是一種黃酮類化合物。主要用于：冠心病、心腦血管疾病，視網(wǎng)膜動(dòng)、靜脈阻塞，突發(fā)性耳聾等療效較好。制備葛根素注射液(5ml：200mg)的原料，國內(nèi)使用純度98%以上的化學(xué)合成品。幾年前葛根素注射液市場異?；鸨嗉已邪l(fā)機(jī)構(gòu)火速申報(bào)，幾十家生產(chǎn)企業(yè)紛紛投產(chǎn)。隨著成品貯存期的延長，臨床使用量加大，各種問題逐漸顯現(xiàn)，該品種又成了媒體聲討的對(duì)象。葛根素注射液的質(zhì)量問題如不研究解決，該品種就不能繼續(xù)生存下去。

　　1 實(shí)驗(yàn)藥品與儀器

　　小容量注射液生產(chǎn)線(通過國家GMP認(rèn)證);酸度計(jì)PP-15(北京賽德利斯);葛根素原料藥(注射級(jí)，煙臺(tái)魯銀藥業(yè)公司，批號(hào)：040407);乙二胺四乙酸二鈉(批號(hào)：031104);焦亞硫酸鈉(批號(hào)：031017);活性炭(注射級(jí)，批號(hào)：040905);丙二醇(注射級(jí)，美國陶氏化學(xué)公司，批號(hào)：040407)。

　　2 方法與結(jié)果

　　2.1 研發(fā)處方 葛根素40g、丙二醇500ml、活性炭5g，制成1000ml。

　　2.2 研發(fā)生產(chǎn)工藝 取丙二醇500ml，升溫至65～75℃，稱取葛根素原料40g，溶于丙二醇中攪拌至全溶，取注射用水400ml加入藥液中混均，按容量稱取0.05%(g/v)活性炭，攪拌吸附30分鐘，過濾，定容，測pH值，精濾分裝。100℃，30分鐘滅菌，即得。

　　2.3 葛根素注射液存在的主要質(zhì)量問題及原因分析

　　2.3.1 貯存過程中藥液變色及原因分析 葛根素注射液剛下線的成品外觀為無色澄明液體或微黃色澄明液體，同批色澤均勻一致。但在貯存1個(gè)多月后有部分藥支變?yōu)辄S色，之后隨著時(shí)間延長變色藥支出現(xiàn)率不斷增加(當(dāng)藥液變?yōu)辄S色時(shí)，變色的藥液pH值也下降至3.7以下)。藥液部分變色導(dǎo)致了同批藥液色澤不一致，外觀性狀不符合規(guī)定。

　　分析認(rèn)為：葛根素屬一種黃酮類化合物，能被一些2～3價(jià)的金屬陽離子催化，發(fā)生反應(yīng)，由無色的藥液變成有色的二氫異黃酮類物質(zhì)。注射用水，配制管線，設(shè)備，金屬離子很少，內(nèi)包裝物安瓿不同支之間可能存在金屬離子分布不均勻的個(gè)體差別，因此導(dǎo)致個(gè)別藥支在貯存1～3個(gè)月內(nèi)完全變成黃色，且先變色的藥支變色較深。

　　不僅金屬離子催化導(dǎo)致變色，安瓿內(nèi)的殘氧量也會(huì)與葛根素發(fā)生反應(yīng)。導(dǎo)致葛根素發(fā)生氧化，生成有色的黃酮衍生物，氧化作用是緩慢發(fā)生的，由于各個(gè)安瓿內(nèi)的含氧量不同，氧化反應(yīng)進(jìn)程不同。因此，各藥支之間產(chǎn)生了不一樣的色差，導(dǎo)致了安瓿間的色差深淺不一致。

　　2.3.2 貯存過程中pH值快速下降的原因分析

　　葛根素注射液標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定成品pH值合格范圍3.5～5.5，研發(fā)工藝在配制時(shí)按慣例將pH值控制在4.5±0.1中限，滅菌后下降約0.3～0.4，貯存時(shí)先變黃的藥支pH值均降至3.7以下，6個(gè)月后其它色澤較淺的藥支也下降至3.9以下。PH值的快速下降，表明葛根素注射液藥液內(nèi)部沒有達(dá)到穩(wěn)定體系，化學(xué)反應(yīng)一直在運(yùn)行，各種反應(yīng)產(chǎn)物呈酸性，造成了pH值快速下降，可以認(rèn)為pH在5.0 以下藥液穩(wěn)定性欠佳。

　　2.3.3 臨床應(yīng)用中過敏反應(yīng)發(fā)生率較高，反應(yīng)嚴(yán)重及原因分析

　　根據(jù)國內(nèi)幾年間發(fā)表的資料表明，葛根素注射液臨床應(yīng)用時(shí)過敏反應(yīng)發(fā)生率較其它注射液品種高，有時(shí)還很嚴(yán)重。研發(fā)處方雖無嚴(yán)重過敏反應(yīng)病例出現(xiàn)，但過敏反應(yīng)出現(xiàn)率也達(dá)5～6%。

　　葛根是一種常用中藥材，毒副作用小，已有幾千年的應(yīng)用歷史，沒有能導(dǎo)致嚴(yán)重過敏反應(yīng)的記載。葛根素注射液中，金屬離子催化的變色反應(yīng)，貯存中的氧化反應(yīng)所產(chǎn)生的各種黃酮衍生物質(zhì)，應(yīng)是真正的致敏物質(zhì)。如果注射液中藥液是一個(gè)穩(wěn)定體系，不發(fā)生各類反應(yīng)，少產(chǎn)生與主藥不同的其它物質(zhì)，就會(huì)降低過敏反應(yīng)發(fā)生率，同時(shí)減輕過敏反應(yīng)的程度。

　　2.4 具體實(shí)施的改進(jìn)措施

　　2.4.1 處方、工藝改進(jìn)的思路 質(zhì)量穩(wěn)定，使用安全的藥品是通過正確的處方，合理的工藝制造出來的，不是檢驗(yàn)出來的，更不是外行能監(jiān)管出來的。盡管葛根素注射液質(zhì)量問題嚴(yán)重，但只要通過技術(shù)改進(jìn)使其藥液達(dá)到一個(gè)穩(wěn)定狀態(tài)，就能解決變色、pH值快速下降問題。化學(xué)反應(yīng)物質(zhì)生成的減少，必然能降低過敏反應(yīng)的發(fā)生，使臨床使用更安全。

　　2.4.2 控制部分藥支變色的措施

　　2.4.2.1 在葛根素處方中添加輔料乙二胺四乙酸二鈉，做為穩(wěn)定劑。用量為千分之0.2(g/v)使它與安瓿內(nèi)壁分解出的微量金屬離子絡(luò)合，阻止金屬離子對(duì)主藥的催化變色反應(yīng)發(fā)生。

　　2.4.2.2 在葛根素處方中添加輔料焦亞硫酸鈉，做為抗氧劑，阻止主藥的氧化反應(yīng)進(jìn)程，使藥液最終成為一個(gè)穩(wěn)定的體系。

　　2.4.3 控制pH值快速下降的措施

　　2.4.3.1 合理的確定焦亞硫酸鈉的加入量。藥劑學(xué)中焦亞硫酸鈉的使用量為2‰～3‰。如果抗氧劑加入量大，會(huì)使藥液在貯存過程中pH值波動(dòng)加大，不利于穩(wěn)定體系的形成。如抗氧劑加入量不足，阻止不了氧化反應(yīng)進(jìn)程，仍可生成黃酮衍生物質(zhì)，產(chǎn)生過敏反應(yīng)，色差等問題。經(jīng)過試驗(yàn)篩選，加入量確定為1.5‰，此時(shí)體系最穩(wěn)定。藥液在貯存期二年內(nèi)始終為無色。如抗氧劑采用亞硫酸氫鈉，藥液則為微黃色。

　　2.4.3.2 適當(dāng)上調(diào)pH值 葛根素pH值控制目標(biāo)，成品貯存二年后pH值應(yīng)高于5.0，尤其考慮到抗氧劑加入后，抗氧劑與氧氣反應(yīng)可生成酸性物質(zhì)，因此決定上調(diào)pH值至5.5上限。貯存中使成品在5.4～5.0弱酸條件下小幅波動(dòng)。

　　2.4.4 控制過敏反應(yīng)的措施

　　抗氧劑 絡(luò)合穩(wěn)定劑的使用使變色反應(yīng)得到控制，藥液不再變色。使pH值穩(wěn)定主藥葛根素分解成其它過敏物質(zhì)的機(jī)會(huì)大大減少了，過敏反應(yīng)會(huì)隨之降低，過敏反應(yīng)的程度會(huì)隨之減弱。

　　2.5 研究結(jié)果

　　2.5.1 改進(jìn)后的處方 葛根素40g，丙二醇500ml，EDTA-二鈉0.2g ，焦亞硫酸鈉1.5g，活性炭5g，制成1000ml。

　　2.5.2 改進(jìn)后的生產(chǎn)工藝 取丙二醇500ml，加水200ml，升溫至65℃左右，稱取葛根素40g，溶解完全，另取100ml水，加入焦亞硫酸鈉1.5g，EDTA-二鈉0.2g攪拌至全溶后，加入藥液中，混勻。加入活性炭，攪拌吸附30分，過濾脫炭，定容，調(diào)節(jié)pH值至5.4～5.5之間，精濾分裝，100℃，30分鐘滅菌，即得。

　　2.5.3 改進(jìn)后的成品與研發(fā)成品問題指標(biāo)對(duì)比觀察 將研發(fā)工藝生產(chǎn)的成品及其產(chǎn)生部分變色，pH值下降，過敏反應(yīng)問題指標(biāo)與改進(jìn)工藝后的成品這三項(xiàng)指標(biāo)做一對(duì)照觀察，結(jié)果見表1。表1 葛根素研發(fā)成品與改進(jìn)后成品問題指標(biāo)對(duì)比(三批綜合)

　　3 討論

　　3.1 藥品研發(fā)單位工業(yè)生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)不足，通過市售藥品成份的測定來反推確定新藥處方組成，制定生產(chǎn)工藝是萬萬要不得的研發(fā)方式。應(yīng)在正確的理論指導(dǎo)下，擬定處方、生產(chǎn)工藝。

　　3.2 藥品生產(chǎn)企業(yè)，應(yīng)該積極參與已委托給研發(fā)單位的新藥研制工作，尤其在輔料確定，生產(chǎn)工藝確定方面。否則，新藥投產(chǎn)就會(huì)有大錯(cuò)誤出現(xiàn)，再進(jìn)行適合工業(yè)生產(chǎn)的改進(jìn)后再申報(bào)，就會(huì)有很大麻煩。