阿托伐他汀鈣片的處方工藝研究

　　摘要：目的：探究阿托伐他汀鈣片的處方工藝。方法：采用四因素三水平正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，以相似因子為評價(jià)指標(biāo)，對風(fēng)險(xiǎn)評估確定的高風(fēng)險(xiǎn)因素羥丙纖維素用量、交聯(lián)羧甲纖維素鈉用量、包衣增重和聚山梨酯80用量進(jìn)行考察，確定阿托伐他汀鈣片的最佳處方工藝條件，并對優(yōu)化的試驗(yàn)結(jié)果考察其體外溶出。結(jié)果：最優(yōu)用量為：羥丙纖維素2%、交聯(lián)羧甲纖維素鈉6%、聚山梨酯800.4%和包衣增重3%(2%～4%均可);體外溶出結(jié)果表明，四種溶出介質(zhì)中f2因子均大于50，溶出行為與原研藥相似。結(jié)論：制備的阿托伐他汀鈣片具有較理想的溶出行為，有進(jìn)一步開發(fā)的價(jià)值。

　　本文源自中國藥劑學(xué)雜志,2020,18(04):212-217.《中國藥劑學(xué)雜志》(網(wǎng)絡(luò)版)(雙月刊)創(chuàng)刊于2003年，是由沈陽藥科大學(xué)主辦的學(xué)術(shù)性科技期刊，主要報(bào)道藥劑學(xué)的新科技動(dòng)態(tài)和科研成果。

　　阿托伐他汀(Atorvastatin)由美國華納蘭伯特公司(現(xiàn)屬于輝瑞制藥有限公司)原研，1997年獲美國FDA批準(zhǔn)上市，商品名Lipitor(立普妥)，是一種3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A(HMG-CoA)還原酶抑制劑類調(diào)血脂藥，用于預(yù)防和治療高膽固醇血癥和冠心病。阿托伐他汀與同類降血脂藥相比具有更強(qiáng)的降脂作用、更少的不良反應(yīng)和較好的患者依從性，是全球最暢銷藥物之一，在世界調(diào)血脂藥物市場上占有重要地位。

　　阿托伐他汀鈣原料藥極微溶于水，如何提高溶出度且與原研藥體外溶出相似是最大難點(diǎn)。本文作者通過對處方變量的風(fēng)險(xiǎn)評估確定影響溶出的高風(fēng)險(xiǎn)因素，采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)和方差分析，篩選出最優(yōu)處方。

　　1、儀器與材料

　　HLSH2-6A濕法混合制粒機(jī)(中航工業(yè)北京航空制造工程研究所)，AR402多功能制粒包衣機(jī)(德國艾維卡公司)，3GFG100實(shí)驗(yàn)室沸騰干燥機(jī)(張家港市榮華機(jī)械制造有限公司)，DP30A單沖壓片機(jī)(北京國藥龍立科技有限公司)，HS153快速水分測定儀(瑞士梅特勒托利多公司)，YD-1片劑硬度測試儀(天津國銘醫(yī)藥設(shè)備有限公司)，F(xiàn)T-2000AE脆碎度測試儀、RC8MD溶出試驗(yàn)儀(天津市天大天發(fā)科技有限公司)，TU-1901紫外可見分光光度計(jì)(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司)，LC-2010CHT高效液相色譜儀(日本島津公司)，LHU-212恒溫恒濕箱(上海愛斯佩克環(huán)境儀器有限公司)。

　　阿托伐他汀鈣(浙江新東港藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)20131001)，阿托伐他汀鈣片(立普妥，輝瑞制藥(大連)有限公司，批號(hào)149210K)，乳糖(上海華茂藥業(yè)有限公司)，微晶纖維素(常熟市藥用輔料有限公司)，碳酸鈣(上海諾成藥業(yè)股份有限公司)，羥丙纖維素(日本曹達(dá)株式會(huì)社)，交聯(lián)羧甲纖維素鈉(FMCBioPolymer)，硬脂酸鎂(安徽山河藥用輔料股份有限公司)，聚山梨酯80(美國Fluka公司)，歐巴代(上海卡樂康包衣技術(shù)有限公司)。

　　2、方法與結(jié)果

　　2.1溶出檢測方法

　　溶出介質(zhì)采用pH1.0鹽酸溶液、pH4.5醋酸鹽緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液和水4種，配制方法參照《普通口服固體制劑溶出曲線測定與比較指導(dǎo)原則》。

　　溶出介質(zhì)體積900mL，槳法，轉(zhuǎn)速50r·min-1，取溶出續(xù)濾液，加溶出介質(zhì)稀釋制成每1mL含阿托伐他汀10µg的溶液，作為供試品溶液;另取阿托伐他汀鈣對照品適量，配制成每1mL含阿托伐他汀10µg的溶液，作為對照品溶液。紫外可見分光光度法241nm波長檢測。

　　2.2制備工藝

　　將阿托伐他汀鈣(API)、微晶纖維素(MCC)、乳糖(LAC)、碳酸鈣(CaCO3)、交聯(lián)羧甲纖維素鈉(CCNa)和羥丙纖維素(HPC)混合均勻，聚山梨酯80(T-80)加入適量純化水中配制成潤濕劑，加入混勻的物料中制軟材，850μm混勻搖擺制粒，60℃流化干燥，1000μm整粒，外加硬脂酸鎂(MS)混合均勻壓片，素片采用歐巴代(Opadry)加純化水配制的固含量12%的包衣液包衣，即得。

　　2.3處方因素風(fēng)險(xiǎn)評估

　　通過對產(chǎn)品特性的分析，確定含量、含量均勻度、溶出度和有關(guān)物質(zhì)為可能受處方影響的關(guān)鍵質(zhì)量屬性(criticalqualityattribute,CQAs)，進(jìn)而對處方變量進(jìn)行了風(fēng)險(xiǎn)評估，結(jié)果見表1。

　　表1阿托伐他汀鈣片處方變量風(fēng)險(xiǎn)分析

　　風(fēng)險(xiǎn)評估是結(jié)合理論知識(shí)與實(shí)際產(chǎn)品特性綜合得出的結(jié)論，依據(jù)如下：

　　CaCO3用量：CaCO3在本品處方中用作穩(wěn)定劑，為處方提供堿性環(huán)境，有利于原料藥的穩(wěn)定。CaCO3用量直接關(guān)系到有關(guān)物質(zhì)水平及產(chǎn)品的穩(wěn)定性，屬于高風(fēng)險(xiǎn)因素。

　　填充劑比例：本品的填充劑為MCC和LAC，二者的比例對處方的可壓性具有一定影響，對其他CQAs均為低風(fēng)險(xiǎn)因素。

　　HPC用量：HPC在本品中用作黏合劑，其用量對于濕法所制顆粒的結(jié)實(shí)程度和最終產(chǎn)品的溶出具有明顯的影響，屬于高風(fēng)險(xiǎn)因素。

　　CCNa用量：CCNa在本品中用作崩解劑，崩解劑通常對溶出具有較大的影響作用，屬于高風(fēng)險(xiǎn)因素。

　　包衣增重：本品的原料藥具有苦味，太低的包衣增重?zé)o法掩蓋苦味，會(huì)造成使用者依從性問題，而過高的包衣增重則會(huì)影響溶出速度，特別是開始階段的溶出速度。因此包衣增重對于溶出屬于高風(fēng)險(xiǎn)因素。

　　MS用量：過量的MS或過長的混合時(shí)間可能引起過潤滑從而導(dǎo)致溶出變慢。本品處方中原料藥比例僅7%，輔料占比較高，這使制得的顆粒性質(zhì)良好，不易黏沖，MS較低的用量即可滿足壓片要求，因此MS用量對于各CQAs均為低風(fēng)險(xiǎn)因素。

　　T-80用量：T-80屬于表面活性劑，其在本品中用于增加原料藥的潤濕性，提高溶出，因此對溶出屬于高風(fēng)險(xiǎn)因素。

　　通過風(fēng)險(xiǎn)評估，確定HPC用量、CCNa用量、包衣增重和T-80用量為影響溶出的高風(fēng)險(xiǎn)因素，設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)篩選以上四因素的最佳用量。

　　2.4正交試驗(yàn)篩選最優(yōu)處方

　　以溶出曲線相似因子(f2因子)為試驗(yàn)指標(biāo)，HPC用量、CCNa用量、包衣增重和T-80用量為試驗(yàn)因素，分別選取3個(gè)水平，進(jìn)行四因素三水平正交試驗(yàn)，因素水平表見表2。

　　表2因素水平表

　　本試驗(yàn)考察的四個(gè)擬定因素均為影響溶出f2因子的處方變量，不存在因素間的交互作用，因此選擇L9(34)正交表安排試驗(yàn)。為了更好地估計(jì)試驗(yàn)誤差，重復(fù)試驗(yàn)兩次，隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)。正交試驗(yàn)方案及試驗(yàn)結(jié)果見表3。

　　表3正交試驗(yàn)結(jié)果

　　對試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行方差分析，方差分析表見表4。

　　表4正交試驗(yàn)結(jié)果的方差分析

　　結(jié)果表明，A、B、D三因素對溶出f2因子有高度顯著影響，C因素對f2因子影響不顯著，兩次重復(fù)試驗(yàn)間差異不顯著，試驗(yàn)誤差不顯著，說明試驗(yàn)精度好，試驗(yàn)結(jié)論可靠。通過比較各因素水平Tij值，可確定因素作用的主次順序?yàn)锽>A>D>C，最佳方案為A1B3C2D2(C因素的三個(gè)水平無顯著差異，均可)，即HPC用量2%、CCNa用量6%、T-80用量0.4%，包衣增重3%(范圍2%～4%均可)。

　　2.5體外溶出曲線對比

　　采用優(yōu)選的處方按“2.2”條制備樣品，按“2.1”條測定pH1.0鹽酸溶液、pH4.5醋酸鹽緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液和水四種溶出介質(zhì)中的溶出曲線，計(jì)算自研樣品在各介質(zhì)中與原研藥品的相似因子(f2因子)。相似因子計(jì)算結(jié)果見表5，溶出曲線對比圖見圖1。

　　表5f2因子結(jié)果

　　圖1自制制劑與參比制劑溶出曲線(A圖：pH1.0介質(zhì);B圖：pH4.5介質(zhì);C圖：pH6.8介質(zhì);D圖：水介質(zhì))

　　由圖1可見，自研樣品與原研藥品在pH1.0鹽酸溶液、pH4.5醋酸鹽緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液和水4種介質(zhì)中溶出趨勢一致，f2因子均大于50，表明自研樣品與原研藥品具有相似的體外溶出行為。

　　3、討論

　　主要運(yùn)用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)法對阿托伐他汀鈣片進(jìn)行處方篩選研究。在正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)中，因素、水平的選擇以及試驗(yàn)指標(biāo)的確定決定著正交試驗(yàn)成功與否。本文中各因素和水平主要是基于對產(chǎn)品的性質(zhì)和各輔料性質(zhì)的理解，通過對處方變量的風(fēng)險(xiǎn)評估來確定，如本品原料藥水溶性差，原研藥品溶出情況是迅速崩散快速溶出，故將崩解劑交聯(lián)羧甲纖維素鈉用量確定為高風(fēng)險(xiǎn)因素，將其高水平設(shè)為常規(guī)用量范圍(1%～6%)的上限;再如本品工藝為濕法制粒，黏合劑將使所制顆粒更結(jié)實(shí)，有利于后續(xù)流化干燥保持顆粒的完整，并為片劑提供良好的硬度和脆碎度，但其用量會(huì)對崩解和溶出產(chǎn)生不利影響，故將粘合劑羥丙纖維素用量確定為高風(fēng)險(xiǎn)因素，將其水平設(shè)為常規(guī)用量范圍(2%～5%)的較低水平;本品原料藥疏水性強(qiáng)，吐溫80的使用有利于降低原料藥的接觸角，更好的潤濕，提高溶出速度。

　　正交試驗(yàn)的結(jié)果分析采用極差分析時(shí)，無法估計(jì)試驗(yàn)誤差，準(zhǔn)確性不高，因此采用方差分析彌補(bǔ)該缺陷。在進(jìn)行方差分析時(shí)，要用誤差偏差平方和SSe及其自由度dfe，因此為進(jìn)行方差分析，所選正交表應(yīng)留出一定空列，當(dāng)無空列時(shí)，應(yīng)進(jìn)行重復(fù)試驗(yàn)，以估計(jì)試驗(yàn)誤差。本試驗(yàn)中四個(gè)擬定因素不存在交互作用，故采用了L9(34)正交表安排試驗(yàn)，由于無空列，因此安排了二次重復(fù)試驗(yàn)。誤差自由度一般不應(yīng)小于2,dfe很小，F(xiàn)檢驗(yàn)靈敏度很低，有時(shí)即使因素對試驗(yàn)指標(biāo)有影響，用F檢驗(yàn)也判斷不出來。本試驗(yàn)在進(jìn)行重復(fù)試驗(yàn)后，dfe達(dá)到8，提高了誤差檢驗(yàn)的靈敏度，得出的試驗(yàn)結(jié)論更可靠。

　　篩選確定的最優(yōu)處方工藝制備的樣品，經(jīng)多條溶出曲線相似性評價(jià)(f2因子法)，自研制劑與原研制劑具有相似的體外溶出行為，驗(yàn)證了處方工藝的合理性。本文的研究方法及結(jié)果具有產(chǎn)業(yè)化開發(fā)的應(yīng)用價(jià)值，但是生物利用度等其他問題還需進(jìn)一步研究。

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