肺炎鏈球菌（Streptococcuspneumoniae，S.pn）的致死率較高，由于其具有多重耐藥菌，臨床治療始終很難攻克這一道難關。因此，只有不斷的進行深入研究，探討其毒力基因的發病機制及存在情況，從而開發出更加完善的抗病疫苗。筆者對臨床分離出的91株肺炎鏈球菌作為研究對象，現將取得的試驗進展報告如下。

1資料與方法

1.1一般資料：選取2007年3月～2012年4月臨床分離出的91株肺炎鏈球菌，其中痰培養75株，血培養10株，分泌物培養4株，腦脊液培養2株。

1.2檢測方法：采用PCR法進行毒力基因的檢測，PCR產物都要經過百分之一瓊脂糖凝膠電泳，然后再使用Bio-Rad紫外凝膠成像分析儀進行檢測，對檢測到的陽性率分別進行記錄以及分析。

2結果

在全部的91株肺炎鏈球菌中LytA、PsaA、NanA、PspA、Ply這5種基因的檢測陽性率分別為94.5%、85.7%、85.7%、61.5%、82.4%。詳見表1。檢測結果見圖1～5。3討論抗S.pn感染的候選蛋白疫苗的主要是其毒力因子，如肺炎球菌溶血素（Pneumolysin，Ply），S.pn表面蛋白A（PneumococealsurfaceproteinA，PspA），S.pn表面黏附素A（PneumococcalsurfacaadhesinA，PsaA）、自溶素（Autolysin，Lyt）等，具有這些蛋白質的獨立或聯合疫苗在S.pn感染疾病的發病機制中起到了重要的作用[1]。因此，了解S.pn毒力因子的存在情況及致病機制對有助于對疫苗的研究。

Lyt在正常情況是無活性的，當S.pn菌體細胞壁合成停止或營養不足或抗生素處理時，Lyt便從LTA上分離，作用于細胞壁的N-乙酰胞壁酸和丙氨酸之間的共價鍵，水解CW為糖鏈和肽鏈，導致細胞溶解[2]。NanA可分解細胞表面或體液中的多糖、糖蛋白、低聚糖上的唾液酸殘基，暴露宿主細胞表面的S.pn黏附受體，從而促進細菌的黏附[3]。PsaA是各型S.pn共有的一種遺傳保守的、種特異性的表面蛋白抗原，具有較好的免疫原性，在S.pn黏附呼吸道黏膜過程中起關鍵作用，可用于S.pn疾病的免疫診斷[4]。

PspA是S.pn重要的毒力因子，其主要作用是與乳鐵蛋白結合使其喪失功能并抑制補體活化，降低C3b在S.pn表面的沉淀從而干擾補體介導的吞噬調理作用，而吞噬調理作用被認為是宿主清除S.pn最主要的途徑[5]。Ply是一種胞內蛋白，分子量52kDa，屬于膽固醇結合毒素類，Ply可與細胞膜表面的膽固醇結合，插入脂質雙分子層，然后通過蛋白質的寡聚化作用形成跨膜孔，使細胞溶解[6]。

本組以肺炎鏈球菌作為研究對象，利用PCR法對肺炎鏈球菌5種毒力基因實施檢測。結果：在全部的91株肺炎鏈球菌中LytA、PsaA、NanA、PspA、Ply這5種基因的檢測陽性率分別為94.5%、85.7%、85.7%、61.5%、82.4%。其中檢出率最高的為LytA，其陽性率為94.5%，最低為PspA，其陽性率為61.5%。

從結果可以看出，5種常見毒力基因在肺炎鏈球菌的分布范圍比較寬廣，能夠為蛋白多肽疫苗的研制作為資料輔助。有些毒力因子，如Ply、PsaA、Psp和lyt，已在動物模型中證實都可誘發保護性免疫力。這些抗原可用為載體蛋白或作為與細胞因子融合蛋白的一部分，其本身也可作為蛋白疫苗[7]。將多種肺炎鏈球菌蛋白質混合制成聯合疫苗、活疫苗及DNA疫苗也是將來研究方向之一。目前，還有眾多疫苗仍在進一步的研究與發展中。