1實(shí)驗(yàn)原理
氯霉素和氧氟沙星對(duì)土壤微生物中的細(xì)菌可能具有抑制作用,可以測(cè)定細(xì)菌對(duì)淀粉的分解速度快慢,來(lái)判斷抗生素是否對(duì)土壤細(xì)菌有殺滅或抑制作用。事前通過(guò)對(duì)比實(shí)驗(yàn)確定氯霉素試劑和土壤浸出液都不能使碘液變藍(lán)。如果在土壤浸出液中加入淀粉溶液,在一定的溫度下,土壤微生物對(duì)淀粉會(huì)分解,用碘液檢驗(yàn)顏色是否變藍(lán)來(lái)判斷分解的快慢。受藥物抑制和殺滅的土壤細(xì)菌對(duì)淀粉的分解速度會(huì)受到影響,從而推斷出抗生素對(duì)土壤微生物的影響。
2實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
2.1器材裝置
1%的淀粉糊、碘液、土壤浸出液、氯霉素試劑(每支0.1g)、氧氟沙星膠囊(每粒0.1g)、100mL錐形瓶、滴管、試管、溫度計(jì)、棉花。
2.2材料準(zhǔn)備
①配置1%的淀粉糊:取2g淀粉加入200mL的熱水中,用酒精燈加熱煮沸,冷卻;②配置碘液:取2g碘化鉀和1g碘,溶于10g蒸餾水中,待溶解后,加入300mL的蒸餾水;③配置土壤浸出液:取100g肥沃的菜園土,放入1000mL燒杯中,加1000mL蒸餾水,用玻棒充分?jǐn)嚢瑁?層的紗布濾去浮渣和草屑,如有泥沙用4層的紗布再過(guò)濾一次。
3實(shí)驗(yàn)步驟
實(shí)驗(yàn)步驟是:①取100mL的錐形瓶10只,用水洗凈后放在烘箱中2h,殺死錐形瓶上殘留的微生物;②給錐形瓶編號(hào),分別是A1、A2,A3、A4、A5;B1、B2、B3、B4、B5;③用量筒準(zhǔn)確量取土壤浸出液50mL,分別倒入10只錐形瓶中;④用量筒準(zhǔn)確量取15mL的淀粉溶液,分別加入到10只盛土壤溶液的錐形瓶中;⑤在A1到A5號(hào)錐形瓶中依次加入4、3、2、1、0支氯霉素試劑(每支0.1g),在B1到B5號(hào)錐形瓶中依次加入4顆、3顆、2顆、1顆、0顆氧氟沙星膠囊的粉末(每顆0.1g)。用棉花塞住瓶口;⑥把兩組裝置同時(shí)放在溫暖,但陽(yáng)光不直射的地方。測(cè)定實(shí)驗(yàn)時(shí)的氣溫;⑦每天固定時(shí)間用滴管取2mL溶液,滴加碘液,檢查微生物對(duì)淀粉的分解情況,并及時(shí)記錄看到的現(xiàn)象(表1)。
4實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象
本實(shí)驗(yàn)不同于在人體內(nèi)的環(huán)境,細(xì)菌對(duì)淀粉等有機(jī)物的分解受pH和溫度的影響較大,在通常溫度下,常常需要一周才能看到明顯的現(xiàn)象。實(shí)驗(yàn)的結(jié)果是:剛開(kāi)始時(shí)滴加碘液后,全部變成藍(lán)色,而未加入抗生素的A5、B5號(hào)錐形瓶中的淀粉在一周后,滴加碘液由原來(lái)的藍(lán)色逐漸變成紫色、淺棕色,最后變成淡黃色。其余錐形瓶中的溶液在滴加碘液后仍為藍(lán)色或淡藍(lán)色。另外,加入0.4g和0.1g氯霉素試劑和氧氟沙星膠囊粉末的錐形瓶中的淀粉分解的時(shí)間相差不大,藍(lán)色的消失不明顯,其中氧氟沙星的顏色變化早于氯霉素,說(shuō)明其對(duì)土壤微生物的抑制作用比氯霉素弱。
5實(shí)驗(yàn)分析
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,抗生素對(duì)土壤細(xì)菌有一定的抑制作用,但并不是全部抑制。從作用效果上看,與劑量大小并不是成正比,隨著抗生素劑量的加大,對(duì)細(xì)菌的抑制作用效果并不十分明顯。實(shí)驗(yàn)啟示說(shuō)明:適量的抗菌素能夠達(dá)到抑制細(xì)菌等微生物的效果,濫用抗生素和過(guò)量使用抗生素,帶來(lái)的將是副作用。
作者:鄭國(guó)建 單位:江蘇省如皋市港城實(shí)驗(yàn)學(xué)校初中部