方法

分組及給藥：取健康大鼠60只，隨機均勻分成空白組、模型組、田七跌打風濕膏組、白酒組、大、小劑量半夏酒糊組，每組10只。實驗前1d將大鼠右后肢脫毛，并測量其周長，實驗當天除空白組外，其余各組將大鼠固定，用1根直徑為3cm、高25cm的空心管置于大白鼠右后肢軟組織上，把1根重約1000g鈍頭鐵杵，自空心管頂端自由落體擊中大鼠右后肢軟組織，造成明顯皮下出血及腫脹的非開放性軟組織損傷模型。造模成功后測量各組大鼠右后肢周長并進行癥狀積分，然后在損傷部位給予相應藥物。田七跌打風濕膏組敷田七跌打風濕膏，厚度2mm，約0.25g/cm2；大、小劑量半夏酒糊組分別以藥棉吸附濃度0.25g/mL、0.15g/mL糊劑后濕敷，用量約0.5mL/cm2；白酒組給予0.25g/mL白酒淀粉糊，用量約0.5mL/cm2；空白組、模型組以藥棉蘸0.9%氯化鈉溶液濕敷，用量約0.5mL/cm2，給藥后均以保鮮膜覆蓋膠布固定，每天保持藥物接觸皮膚6h，6h后以0.9%氯化鈉溶液洗凈藥物，每日1次，共5d。觀測指標：每天觀察并記錄第1、3、5天傷肢癥狀積分和周長變化（周長變化=用藥后周長-用藥前周長，小于0按0記）。大鼠外傷血瘀癥狀積分評定標準：①皮下瘀血：多量塊狀計2分；少量點狀計1分；無瘀血者計0分。②肌肉腫脹：明顯腫脹計2分；稍有腫脹計1分；無腫脹者計0分。③肌肉顏色：紫暗色深計2分；暗紅色淺計1分；色澤正常計0分。在給藥后第6天早上眼眶取血，檢測血液流變學指標，取大鼠傷肢軟組織固定于10%甲醛溶液中，常規病理切片，進行病理觀察。統計學方法：數據分析用SPSS13.0forWindows統計軟件包進行數據資料的統計學處理，計量資料用x-±s表示，等級資料采用Ridit檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

結果

對大鼠外傷血瘀模型損傷部位的肉眼觀察從表1可以看出，與空白組比較，模型組大鼠右后肢損傷癥狀積分均顯著升高（P<0.01），說明造模成功；造模第1天，與模型組比較，各組大鼠右后肢損傷癥狀積分均無顯著性差異，說明分組均勻；自造模第3天起，與模型組比較，大劑量半夏酒糊組、田七跌打風濕膏組、小劑量半夏酒糊組均可顯著降低大鼠右后肢損傷癥狀積分（P<0.01，P<0.05）。白酒組大鼠右后肢損傷癥狀積分沒有明顯的影響。

對大鼠外傷血瘀模型右后肢周長的影響從表2可以看出，與空白組比較，模型組大鼠造模后右后肢周長變化均顯著性升高（P<0.01），說明造模成功。第1天與模型組比較用藥各組右后肢周長變化無顯著性差異，說明分組均勻。第3、5天，與模型組比較，大、小劑量半夏酒糊組和田七跌打風濕膏組右后肢周長變化值均顯著減小（P<0.05，P<0.01），白酒組對大鼠造模后右后肢周長變化沒有明顯的影響。

對大鼠外傷血瘀模型血液流變學的影響從表3可以看出，與空白組比較，模型組的血液流變學各項指標均顯著升高（P<0.01），說明造模成功；與模型組比較，大劑量半夏酒糊組和田七跌打風濕膏組可顯著降低血液流變學各項指標（P<0.01）；小劑量半夏酒糊組可顯著降低全血黏度、血漿黏度、紅細胞壓積、全血高切還原黏度、全血低切還原黏度、紅細胞聚集指數、全血低切相對黏度（P<0.01），可明顯降低紅細胞剛性指數、全血高切相對黏度（P<0.05）。白酒組對大鼠血液流變學各項指標沒有明顯的影響。

對大鼠外傷血瘀模型病理組織學的影響大鼠右后肢皮膚血瘀組織的病理組織學觀察結果：空白組動物皮膚的角質層、鱗狀細胞層、皮下組織中的毛囊、結締組織均正常；模型組動物皮膚的角質層、鱗狀細胞層變薄，皮下組織可見水腫和大量的血漿滲出，毛囊與結締組織散落呈片狀，可見少量的纖維增生；田七跌打風濕膏組動物的皮膚表皮的各層結構和真皮層結構中的毛、毛囊、汗腺、皮脂腺明顯的恢復；白酒組動物皮膚的角質層、鱗狀細胞層稍有增厚，皮下組織水腫和血漿的滲出明顯減少，毛囊與結締組織破碎；大劑量半夏酒糊組動物皮膚的角質層、鱗狀細胞層增厚、皮下組織中的水腫和血漿的滲出消失，有少量的炎細胞滲出；小劑量半夏酒糊組動物皮膚的角質層、鱗狀細胞層變薄和破損，皮下組織中的還有少量的水腫和血漿的滲出，毛囊、結締組織基本正常。經Ridit檢驗，與空白組比較，模型組出現顯著的病理組織損傷（P<0.01），說明造模成功；與模型組比較，田七跌打風濕膏組、大、小劑量半夏酒糊組均可顯著的改善動物的病理組織損傷（P<0.01），白酒組減輕局部病變作用不明顯。

討論

血瘀證是指人體內血行不暢、擁塞血脈或血溢脈外、停積為瘀的癥候。外傷血瘀是在外力作用下如杠桿擠壓或懸垂重物砸傷而成的血瘀證模型，原理來源于《黃帝內經》“若有所墮墜，惡疝，在內而不去則氣血凝結”的論述[3]。肌肉豐富的部位受到外力的撞擊或擠壓，由于局部缺血會對機體引起局部及全身的雙重反應，表現為固定疼痛、拒按、功能性障礙、病理性血腫及血液流變學的改變等，還影響了血瘀患者的運動[4-5]。

本實驗采用定量化重物擊傷動物單側后肢的方法造動物外傷血瘀模型，以皮未破而內損為度[6]。該方法常見，簡便易行，成功率高。在地震和工傷事故中重物擊傷是一種常見的造成血瘀的原因，動物模型是當代醫學研究中的重要技術平臺，應用這一造模方法對外傷血瘀證進行研究具有現實的意義。本實驗通過對模型大鼠右后肢損傷癥狀積分、右后肢同部位周長差、血液流變學和病理變化[7]指標對半夏酒糊療效進行評價，大鼠右后肢損傷癥狀積分、右后肢同部位周長差變化指標可直觀反映出損傷部位病變程度，指標觀測方法操作簡單方便；血液流變學是血瘀狀況的重要觀察指標，血液流變性、血流動力學變化與血瘀形成具有相關性[8-9]；病理組織學變化可反映損傷組織皮膚炎細胞侵潤程度和愈合情況。

實驗結果顯示，大劑量半夏酒糊組可顯著降低大鼠第3、5天損傷癥狀積分、右后肢造模前后周長變化，可顯著降低全血黏度、血漿黏度、紅細胞壓積、全血高切還原黏度、全血低切還原黏度、紅細胞聚集指數、全血低切相對黏度、紅細胞剛性指數、全血高切相對黏度、紅細胞變形指數，顯著改善大鼠病理組織損傷；小劑量半夏酒糊組可明顯降低大鼠第3、5天損傷癥狀積分、顯著降低右后肢造模前后周長差，小劑量半夏酒糊組可顯著降低全血黏度、血漿黏度、紅細胞壓積、全血高切還原黏度、全血低切還原黏度、紅細胞聚集指數、全血低切相對黏度，可明顯降低紅細胞剛性指數、全血高切相對黏度，可顯著改善大鼠病理組織損傷。提示半夏外用對外傷血瘀具有好的療效，且其療效以大劑量半夏酒糊組為優。