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探索避免生物安全事故發生的新策略

2021-4-9 | 生物安全論文

作者:顧杰 單位:陜西中醫學院基礎醫學院

實驗標本帶來的生物安全隱患實驗標本的來源多樣,生化檢測時使用的體液或血液標本,很可能攜帶有HAV、HBV、HCV、HDV、HEV、HIV、巨細胞病毒等具備生物危害性的各類感染因子,盡管處理這些標本的都是專業實驗室技術人員,但由于標本情況未知或說明中缺乏相關描述,因此仍存在有很高的接觸風險。在對這些樣品進行離心分離或渦旋混合的過程中,產生的氣溶膠會嚴重威脅到實驗人員的健康。進行標本內活細胞的分析/分選、CD3/CD4/CD8淋巴細胞表面抗原檢測、腫瘤細胞DNA/RNA含量分析、免疫細胞檢測等操作時,會使用到流式細胞儀等大型儀器。大部分的流式細胞儀都安裝在開放實驗室中[4],在這種非隔離的環境條件下,實驗人員的粘膜及皮膚一旦與標本的濺液直接接觸,也可能對實驗人員造成感染。

實驗動物帶來的生物安全隱患在動物實驗中,不可避免的需要使用到注射器、手術刀和其他種類的“利器”。如果實驗室工作人員的皮膚因此受損,受到感染的概率會大大增加。實驗動物本身的質量是最為關鍵的因素。使用微生物學質量不合格的實驗動物,很可能引入各種類型的人獸共患病或動物烈性傳染病病原體。例如,2010年東北農業大學的一次羊活體動物實驗中,由于未對羊進行嚴格檢驗,而致使28名師生感染布魯氏桿菌,造成了嚴重的生物安全事故。另外,即便是清潔級的實驗動物,同樣可能攜帶生物感染因子。實驗動物自身的屬性決定了其作為獨立的生命體,攜帶微生物的概率與普通物品相比高出很多。而實驗動物又只能經潔凈運輸和外包裝消毒完成凈化[5],無法接受其他更為直接的消毒方式,因此更易攜帶感染因子。需要引起重視的是,在實驗動物的日常飼養過程中,管理不當同樣可能導致原本潔凈的實驗動物受到病原微生物的污染。如果被感染的動物通過呼吸、糞便和尿液將病原體傳播至整個室內環境,而實驗人員恰好疏于防護,就很有可能因接觸到污染物而被感染。2007年3月,廣州市某高校實驗動物中心發生的腎綜合征出血熱感染事件[6],便是因為野鼠將病毒傳播至開放飼養區大白鼠,最終導致實驗室工作人員感染發病的。

實驗試劑及廢棄物帶來的安全隱患醫學研究涉及的生化試劑種類繁多,性能和毒性各自不同。常見的劇毒種類有溴化乙錠、Trizol、丙烯酰胺、DEPC、甲酰胺等。在操作這些試劑的過程中,通過氣溶膠產生擴散污染是最常見的危害方式[7]。例如在吸取氯仿、四氯化碳等有毒揮發性氣體時,氣溶膠會直接刺激和腐蝕實驗人員的皮膚、眼睛、呼吸道等。若被實驗人員大量吸入,則可對其造成嚴重的肝腎損傷。實驗廢棄物,具有攜帶各種類型感染因子的可能。較為常見的種類包括沾有殘液的廢棄槍頭、EP管、針頭等等,均需小心處理。除此之外,對基因操作完成后產生的抗藥性菌株,也需完全滅活后才可丟棄。這些抗藥性菌株是經過增殖、重組、質粒轉化步驟之后,篩選出的陽性克隆,一旦隨意丟棄任其與環境中的致病菌交換遺傳物質,令致病菌由此獲得抗藥性,則會引發相當嚴重的后果。

開展生物安全培訓在實際工作中,預防實驗室生物安全事故的最有效措施,是做好人員的培訓工作。生物安全意識,需要從人員進入實驗室的第一天起開始培養,即設立完整的生物安全專項培訓計劃。在培訓過程中,可以考慮以下幾個重點問題:首先,讓被培訓人員了解實驗室內容易發生感染的途徑及原因,提高自身的安全防范意識,盡量避免如誤食、皮膚切割、針刺、動物抓咬以及有害氣體吸入等導致的實驗室感染事故的發生[8]。其次,針對實驗內容,進行操作技術方面的具體培訓,從而讓被培訓人員充分掌握生物安全操作的整個流程。如高壓滅菌器、生物安全柜、通風櫥和超凈工作臺等生物安全設備的使用方法;移液管和電動移液器使用方法;標本在每一個操作過程中的處置標準及廢棄物處理;個人防護措施;誤操作的處理辦法等內容。有數據顯示,實驗室感染中65%以上的感染是由氣溶膠引起的[9]。因此需要特別強調氣溶膠的重要性,輕柔操作易產生氣溶膠的步驟,包括離心、混合震蕩、電動勻漿、移液器吹打、開啟橡膠瓶塞、去注射器針頭等,以最大程度的減少空氣污染。在整個培訓結束后,可利用考核的方式檢驗培訓效果,凡取得培訓合格證的人員才允許開展相關實驗。

加強實驗室制度建設實驗室安全事故的嚴重后果,充分說明了加強實驗室制度建設的重要性和迫切性。世界衛生組織1983年頒布的《實驗室生物安全手冊(第一版)》是全世界第一部有關實驗室生物安全和減少實驗室事故發生的指導性規程,該手冊經過2003年及2005年的兩次改版,已被世界各地廣泛接受和使用。經過了多年的發展,我國也已出臺多部有關實驗室生物安全的國家標準,如GB19781-2005《醫學實驗室安全要求》、GB19489-2008《實驗室生物安全通用要求》、國務院令第424號《病原微生物實驗室生物安全管理條例》等。在實驗室管理過程中,需要嚴格執行這些指導性要求。除了指導性要求建立的制度框架之外,對于本單位的實際情況,還可以設立各項詳細的生物安全管理制度及規范,全面提升管理的有效性。例如,評估實驗的生物安全風險級別;動物管理制度;實驗日志制度;值周制度;違規懲罰制度;冰箱及超低溫冰箱試劑樣品保存制度;儀器操作規范;個人防護要求;安全消毒程序;危險隱患報告程序;生物安全事故應急體系和預案等。從而最大程度的避免和控制這類生物安全事故的發生。

緊抓思想監督從已被報道的多起生物安全事故中不難發現,與實驗人員麻痹大意有關的意外事件占了很大比例。2003~2004年間,新加坡、中國臺灣和中國大陸三地實驗室,就曾分別發生因實驗人員疏忽而造成的SARS實驗室感染事故。可以說,主觀上不遵守實驗室的安全操作規則和程序,即便有再完善的設備和標準的操作程序也無法杜絕所有安全事故的發生。通常情況下,任何一位初進實驗室的人員,都會在種種警告下格外小心,完全按照標準化規范進行操作,但久而久之后卻會在思想上有所松懈,產生一系列不安全行為。如使用高壓滅菌鍋時,隨意減少滅菌時間或壓力,導致滅菌效果無法保證;超速離心機轉子在兩端未完全配平的情況下離心,離心管出現破損,導致樣品外溢;實驗過程中,省略必要的防護;操作不夠輕柔,產生不必要的氣溶膠懸浮污染;人疲勞操作,引發不安全行為等。因此,實驗室管理人員,在努力提高自身業務能力的同時,需進一步改進管理方式,提高效率,保證效果。只有管理者和被管理者共同努力,才可能將事故的風險降至最低。日常工作中,除了管理人員監督之外,積極的引導每位實驗成員參與到思想監督的工作中去。實行周內負責制,管理人員帶班的研究生值日制等方式,均可作為很好的思路進行嘗試。

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